试管凝集试验与虎红平板凝集试验在布鲁氏杆菌

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试管凝集试验与虎红平板凝集试验在布鲁氏杆菌

石庆芬+刘学真+谭磊

[摘要]目的比较试管凝集试验与虎红平板凝集试验在布鲁氏杆菌病诊断中应用价值。方法方便选取济南市传染病医院及解放军第404医院普外科2014年8月—2016年8月收治的128例布鲁士氏杆菌病患者为研究对象,均取静脉血,再行试管凝集、虎红平板凝集试验,试管凝集试验与虎红平板凝集试验在布鲁氏杆菌 比较两种检测方法结果。结果该组128例患者血清中,结果显示:RBPT呈阳性24例(18.75%);SAT呈阳性20例(15.63%),其中1∶100有10例,1∶100以上有10例,可疑6例,两种检测方法的阳性符合率为93.81%,试管凝集试验与虎红平板凝集试验的阳性检出率比较差异无统计学意义(P>0.05),试管凝集试验特异性高,虎红平板凝集试验敏感性高。结论试管凝集试验可用于确诊初筛阳性及诊治临床患者,虎红平板凝集试验可用于初筛、调查流行病;若结合两种方法用于诊断布鲁氏杆菌病,可提高阳性检出率,避免假阳性。

[关键词]试管;虎红平板;凝集试验;布鲁氏杆菌病

[中图分类号]R516.7[文献标识码]A[文章编号]1674-0742(2017)01(c)-0105-03

ComparisonofApplicationValueofTubeAgglutinationTestandRpstinDiagnosisofBrucellosis

SHIQing-fen1,LIUXue-zhen2,TANLei1

1.DepartmentofClinicalLaboratory,JinanInfectiousDiseaseHospital,Jinan,ShandongProvince,250021China;2.DepartmentofGeneralSurgery,PLA404thHospital,Weihai,ShandongProvince,264200China

[Abstract]ObjectiveTocomparetheapplicationvalueoftubeagglutinationtestandrpstindiagnosisofbrucellosis.Methods128casesofpatientswithbrucellosisadmittedandtreatedinourhospitalfromAugust2014toAugust2016wereconvenientselectedastheresearchobjectsandtheveinbloodwasextractedfortubeagglutinationtestandrpst,andthetestresultsofthetwomethodswerecompared.ResultsIntheserumof128casesofpatients,theresultsshowedthattheRBPTof24caseswaspositive,accountingfor18.75%,theSATof20caseswerepositive,accountingfor15.63%,10caseswere1∶100and10caseswereabove1∶100and6casesweresuspected,thepositivecoincidencerateofthetwomethodswas93.81%,andthedifferenceinthepositivetestratebetweenthetubeagglutinationtestandrpsthadnostatisticalsignificance(P>0.05),thespecificityoftubeagglutinationtestwashighandthesensitivityofrpstwashigh.ConclusionThetubeagglutinationtestcanbeusedtodiagnosetheclinicalpositivepatients,andtherpstcanbeusedforpreliminaryscreeningandsurveyofepidemicdiseases,andtheapplicationofthecombinationofthetwomethodsindiagnosingthebrucellosiscanimprovethepositivetestrateandavoidthefalsepositiveresults.

[Keywords]Tube;Rose-BengalPlate;Agglutinationtest;Brucellosis

布魯氏杆菌病是一种传染-变态反应性传染病,由布鲁氏菌属细菌入侵人体所引起,属人畜共患疾病[1]。人体内的布鲁氏菌病来源于动物传播,若人类患有该病,可造成公共卫生问题。布鲁氏菌病的传播根除关键在于扑杀患病动物,切断传播源及灭杀传染源。因此,寻求布鲁氏杆菌病的准确、快速的检测方法,有助于疾病的防治,控制疾病发生与流行。该研究旨在分析试管凝集试验与虎红平板凝集试验用于诊断布鲁氏杆菌病的效果,现选取2014年8月—2016年8月于济南市传染病医院、解放军第404医院收治的128例布鲁士氏杆菌病患者临床资料为研究对象,现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

方便选取该院收治的128例布鲁士氏杆菌病患者为研究对象,其中男63例,女65例,年龄21~78岁,平均(55.64±20.15)岁。所有患者均于患病前接触过家畜或畜产品,存在持续高烧、发力、多汗及肌肉、关节酸痛等可疑症状。

1.2方法

该组患者均于清晨空腹抽取静脉血,存于-20℃冰箱内备用。先行虎红平板凝集试验(RBPT),再行试管凝集试验(SAT),操作如下:①RBPT:在玻片上用蜡笔划出方格,加入血清0.03mL,再将0.03mL布鲁氏菌病虎红平板抗原加入血清,摇匀后,在20℃室温下观察结果5min,对照阳、阴性血清,若呈“+”以上反应,则为阳性。②SAT:血清装于5支小试管内,第1支试管,加入0.5%石碳酸生理盐水(国药准字H14020458)2.3mL,第2支试管无任何添加,第3、4、5支试管内各加入0.5mL石碳酸生理盐水。第1支试管中加入0.2mL血清,摇匀;吸取0.5mL第3管混合液加至第4管,摇匀;再吸取0.5mL第4管混合液加至第5管,摇匀;再吸出0.5mL第5管混合液丢弃。按此稀释,自第2~5管的血清稀释比分别是1:12.5、1∶25、1∶50、1∶100。予以0.5%石碳酸生理盐水稀释抗原1∶10,再将稀释抗原加至各稀释血清中,第1管作为血清对照不加入,其余加入0.5mL,从第2~5管血清稀释比为1∶25、1∶50、1∶100、1∶200;最后对照阳、阴性血清。

1.3观察指标与结果判定

观察该组布鲁氏菌抗体采取两种方法检测的结果。RBPT结果判定:阳、阴性血清试验结果准确对照下,阳性:血清可见凝集反应;阴性:血清无凝集反应。SAT结果判定:判定依据以试验配制比浊管为准,结果呈“++”为血清凝集最高稀释度,阳性:1∶100(++)及以上;可疑:1∶50(++)[2-3]。

1.4统计方法

数据用SPSS21.0统计学软件分析,正态计量资料用(x±s)表示,两组间比用t检验,计数资料组间率采用χ2检验,计数资料用[n(%)]表示,P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

该组128例患者血清中,结果显示:RBPT呈阳性24例(18.75%);SAT呈阳性20例(15.63%),其中1∶100有10例,1∶100以上有10例,可疑6例,两种检测方法的阳性符合率为93.81%,试管凝集试验与虎红平板凝集试验的阳性检出率比较差异无统计学意义(P>0.05,χ2=0.4391),详见表1。

3讨论

布鲁氏杆菌病作为人畜共患的一种传染病,疾病传播范围广且快,目前,临床诊断该病的常用方法为血清抗体检测法。在该研究中,该院对收治的128例布鲁氏杆菌病患者先后采取虎红平板凝集试验、试管凝集试验,比较两种检测方法的结果,结果显示:RBP试管凝集试验与虎红平板凝集试验在布鲁氏杆菌T呈阳性24例(18.75%);SAT呈阳性20例(15.63%),其中1∶100有10例,1∶100以上有10例,可疑6例,两种检测方法的阳性符合率为93.81%,但两种检测方法的阳性检出率比较差异无统计意义。这与饶国利等[4]文献研究结果比较一致性较高,RBPT阳性检出率15.72%,SAT阳性检出率12.23%。由此可知,虎红平板凝集试验敏感性好,试管凝集试验特异性好。试管凝集试验可用于早期诊断布鲁氏杆菌病,亦可用于检测布鲁氏菌疫苗免疫后机体最早血清抗体,是国家诊断布鲁氏杆菌病的正式法定试验。考虑到两种检测方法的结果判定是通过肉眼观察比较浑浊度,易受人为因素干扰,加上试验结果需20h后可获得,时间长,故在无专业实验室条件下,虎红平板凝集试验成本低,操作简便,可快速、容易的判断结果,加之其敏感性强,该检测法适用于大范围筛查布鲁氏杆菌病或调查流行病学[5]。

血清抗体检测是检验布鲁氏菌病的有效途径,包括虎红平板与试管凝集试验两种,是人间诊断布鲁氏菌病的常用血清学诊断法。RBPT检出抗体属IgG类,其操作简便、迅速,特异性、敏感性均较高,可短时间定性分析出布鲁氏菌病感染结果,适于大范围初筛布鲁氏菌病;非特异性抗体易干扰RBPT呈现出非特异性凝集,显示假阳性,但假阳性率较低,试验结果若呈阳性,还需通过SAT试验以确诊[6-7]。纤维蛋白原与虎红试剂反应显现非特异性凝集,故不可用血浆做RBPT试验,否则结果为假阳性[8]。在检测前,需观察采血管内有无抗凝剂,若有则需重新采血。SAT检出抗体属IgM类,试验时间需20~22h,需大量患者血清及布鲁氏菌凝集抗原,其为国际规定检测法,特异性好,不受非特异因子干扰,可定性分析布鲁氏菌病,还可定量测定抗体滴度,用于临床诊断、观察及评估疗效[9-10]。布鲁氏菌病出现特异性抗体的早晚、抗体的滴度高低、抗体消长速度均可用于诊断疾病,且对评估疗效及预后具积极意义。

综上所述,虎红平板凝集试验敏感性好,试管凝集试验特异性好,将两种检测方法结合,可互补优劣,提高布鲁氏杆菌病诊断准确性。对于大面积筛查试管凝集试验与虎红平板凝集试验在布鲁氏杆菌,可先用虎红平板凝集试验检测,再用试管凝集试验确诊阳性率,结合临床体征、流行病学诊断布鲁士杆菌病患者,有助于其临床诊治。

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